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石斑鱼虹彩病毒，在养殖石斑鱼中致死率较高，因此迫切需要有效的药物来控制石斑鱼虹彩病毒感染。金银花（L.japonica）是一种著名的药用植物。本研究从中国广西的石斑鱼中提取了虹彩病毒（SGIV-Gx）并评估了金银花各组分在抗SGIV-Gx感染中的应用。
金银花组分效应浓度的确定
通过光镜观察和CCK-8溶液测定细胞活性确定了金银花各组分最安全，适宜的效应浓度。(LAE ≤ 10 mg/mL, CGA ≤ 250 μg/mL,CCGA≤500 μg/mL, IAA ≤ 250 μg/mL, IAB ≤ 250 μg/mL,IAC ≤ 500 μg/mL, CA ≤ 125 μg/mL)
金银花各组分对杂交石斑鱼组织学的影响
腹腔注射金银花组分10天后的石斑鱼，其肝脏和脾脏组织没有病理变化。
利用核酸适配体Q3荧光分子探针（Q3-AFMP）特异性检测SGIV-Gx感染
流式细胞仪检测结果显示，靶细胞SGIV-Gx的荧光强度随SGIV-Gx感染时间的延长而增强，表明Q3-AFMP可监测SGIV-Gx的感染过程。
利用光镜分析金银花组分抗病毒活性
光镜观察发现正常GS细胞无细胞病变作用；SGIV-Gx，SGIV-Gx+CGA，SGIV-Gx+CCGA三组出现大量细胞病变作用；SGIV-Gx与其它各组分（LAE，10mg/mL；IAA，250μg/mL；IAB，250μg/mL；IAC，500μg/mL；CA，125μg/mL；LT，500μg/mL；IS，500μg/mL）共孵育的细胞中出现少量细胞病变作用。
利用Q3-AFMP分析金银花组分抗病毒活性
实验结果显示CGA与CCGA对细胞荧光强度几乎无影响，其他组分（LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT和IS）使细胞的荧光强度显著降低，表明这些成分具有抗SGIV-Gx感染的活性。
利用RT-qPCR分析金银花组分抗病毒活性
实验结果显示一些组分（LAE，IAA，IAB，IAC，CA，LT，IS）使MCP基因在GS细胞中的表达显著下降，这表明这些组分能显著抑制SGIV-Gx感染。此外，有趣的是，在某些工作浓度下，CGA（62.5-125μg/mL）和CCGA（125-250μg/mL）甚至可以促进MCP基因表达和病毒复制。
金银花各组分对SGIV-Gx感染的抑制率
根据RT-qPCR的抗病毒活性结果，进一步评价了在安全工作浓度下，各组分对SGIV-Gx感染的抑制率。结果表明，金银花的组成成分（LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT）对SGIV-Gx感染具有最有效的抗病毒活性。
金银花组分对SGIV-Gx的体内抗病毒活性
选择金银花组分LAE，IAC和LT进行体内抗SGIV-Gx活性评价。各组存活率如图所示，实验结果表明金银花组分在体内对SGIV-Gx感染具有保护作用。
总结：
本研究首先确定了金银花各组分的安全、适宜效应浓度。然后采用光镜、Q3-AFMP和RT-qPCR三种方法分析了金银花各组分对SGIV-Gx感染的抑制作用，结果表明，金银花部分成分（LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT、IS）对SGIV-Gx感染具有较好的抗病毒活性，抑制率达90%以上。本研究的结果表明，金银花的成分具有抗病毒作用，金银花可用于开发防治养殖石斑鱼SGIV-Gx感染的有效药物。
